В нормальной моче диастаза содержится в небольшом количестве — 16—64 единицы. Количество выше 128 единиц указывает на патологию (панкреатит, некроз поджелудочной железы, заболевание желчных путей). При продолжительной закупорке протока поджелудочной железы количество диастазы в моче может снизиться. При почечной недостаточности диастаза в моче отсутствует.
Метод определения диастазы мочи основан на переваривании крахмала диастазой.
Необходимые реактивы
1. Физиологический раствор (0,85%-ный раствор хлорида натрия).
2. Буферный раствор фосфата рН 7,2.
3. Толуол.
4. Раствор крахмала: 60—70 мл физиологического раствора нагревают до кипения. В отдельную пробирку наливают 2—3 мл физиологического раствора и всыпают туда 1 г растворимого крахмала, тщательно размешивают его стеклянной палочкой, вливают его тонкой струей в кипящий физиологический раствор и смешивают. Пробирку несколько раз ополаскивают небольшими порциями физиологического раствора, выливая их в тот же стакан, дают вскипеть. После охлаждения переносят в мерную колбу на 100 мл и доливают физиологический раствор до метки. Этот 1%-ный раствор крахмала разводят в 10 раз физиологическим раствором. К 90 мл полученного 1%-ного раствора крахмала приливают 10 мл буферного раствора фосфатов с рН 7,2 и 10 мл толуола (при хранении в прохладном темном месте раствор стоек в течение 3 месяцев). При отсутствии фосфатного буфета 1%-ный раствор крахмала годен в течение нескольких дней.
Для исследования необходим также приблизительно 0,02 N раствор йода: 20 мл 0,1 N раствора отмеривают в мерную колбу емкостью в 100 мл и доводят до метки водой. Можно пользоваться раствором Люголя.
Ход исследования
В штатив ставят 15 пробирок, разливают в каждую пробирку, кроме первой, по 1 мл физиологического раствора. В первую и вторую пробирку наливают по 1 мл испытуемой мочи, смешивают. Из второй пробирки переносят 1 мл смеси в третью, смешивают и 1 мл смеси переносят в четвертую и т.д. до пятнадцатой, из которой 1 мл смеси выливают. Объем жидкости в каждой пробирке 1 мл. Разведения смесей, начиная со второй пробирки: 2, 4, 8 и т.д.
В каждую пробирку наливают по 2 мл 1%-ного раствора крахмала и ставят весь штатив на 15 мин на водяную баню при 45 °C, после чего штатив переносят в холодную воду (для прекращения действия фермента).
После этого в каждую пробирку вносят по одной капле 0,02 N раствора йода и наблюдают за стойкостью окрашивания в пробирках (синего, красно-синего, красного или желтого). Если окраска исчезает быстро, то прибавляют по каплям йод, пока она не будет исчезать в течение нескольких минут.
Расчет: в той пробирке, где жидкость окрашена в синий цвет, диастатического действия нет. Оно закончилось в предыдущей пробирке, которую и берут для расчета. Например: в шестой пробирке имеется непереваренный крахмал. Вычисляют, какое количество мочи содержится в пятой пробирке (разведение 1 : 16), где нет синего оттенка. 1/16 мл мочи переваривает 2 мл крахмала, 1 мл мочи — 32 мл крахмала.
Структура женской груди
Молочная железа женщины циркулярно отграничена от прилежащих тканей, за исключением верхнего наружного квадранта, где имеется так называемый аксиллярный сухож... перейти Краниосиностоз
Краниосиностоз, или преждевременное закрытие венечного, сагиттального, лобного или ламбдовидного швов, может быть первичным или вторичным. Последние могут развиваться под действием тератогенных фактор... перейти Переломы нижней челюсти
КЛАССИФИКАЦИЯ
По аналогии с переломами длинных костей, переломы нижней челюсти можно описать как закрытые, открытые, простые, сложные и раздробленные. Переломы нижней челюсти, проход... перейти Переломы верхней челюсти (переломы Le Fort)
Подходы к лечению переломов средней части лица разительно изменились за прошедшие два десятилетия. При точной диагностике с помощью компьютерной томографии, улучшенных хирургических доступах и методик... перейти Остеосинтез
Неотъемлимой частью пластической хирургии лица является остеосинтез. В частности – остеосинтез мозгового и лицевого черепа. Базовые знания строения кости на клеточном уровне, а также знание биотехноло... перейти Повреждения лица
Острые повреждения мягких тканей лица имеют большое значение для пациента и для хирурга вследствие потенциально значимых функциональных и косметических нарушений. Так как лицо человека имеет исключите... перейти Парализованное лицо
Парализованное лицо — это потенциально катастрофическое состояние. К сожалению, лицевой нерв наиболее часто из всех нервов человеческого организма подвергается параличу. Это нарушение оказывает огромн... перейти
Все новости медицины
