Определение диастазы мочи

фото Определение диастазы мочи
В нормальной моче диастаза содержится в небольшом количестве — 16—64 единицы. Количество выше 128 единиц указывает на патологию (панкреатит, некроз поджелудочной железы, заболевание желчных путей). При продолжительной закупорке протока поджелудочной железы количество диастазы в моче может снизиться. При почечной недостаточности диастаза в моче отсутствует.

Метод определения диастазы мочи основан на переваривании крахмала диастазой.

Необходимые реактивы
1. Физиологический раствор (0,85%-ный раствор хлорида натрия).

2. Буферный раствор фосфата рН 7,2.

3. Толуол.

4. Раствор крахмала: 60—70 мл физиологического раствора нагревают до кипения. В отдельную пробирку наливают 2—3 мл физиологического раствора и всыпают туда 1 г растворимого крахмала, тщательно размешивают его стеклянной палочкой, вливают его тонкой струей в кипящий физиологический раствор и смешивают. Пробирку несколько раз ополаскивают небольшими порциями физиологического раствора, выливая их в тот же стакан, дают вскипеть. После охлаждения переносят в мерную колбу на 100 мл и доливают физиологический раствор до метки. Этот 1%-ный раствор крахмала разводят в 10 раз физиологическим раствором. К 90 мл полученного 1%-ного раствора крахмала приливают 10 мл буферного раствора фосфатов с рН 7,2 и 10 мл толуола (при хранении в прохладном темном месте раствор стоек в течение 3 месяцев). При отсутствии фосфатного буфета 1%-ный раствор крахмала годен в течение нескольких дней.

Для исследования необходим также приблизительно 0,02 N раствор йода: 20 мл 0,1 N раствора отмеривают в мерную колбу емкостью в 100 мл и доводят до метки водой. Можно пользоваться раствором Люголя.

Ход исследования
В штатив ставят 15 пробирок, разливают в каждую пробирку, кроме первой, по 1 мл физиологического раствора.


В первую и вторую пробирку наливают по 1 мл испытуемой мочи, смешивают. Из второй пробирки переносят 1 мл смеси в третью, смешивают и 1 мл смеси переносят в четвертую и т.д. до пятнадцатой, из которой 1 мл смеси выливают. Объем жидкости в каждой пробирке 1 мл. Разведения смесей, начиная со второй пробирки: 2, 4, 8 и т.д.

В каждую пробирку наливают по 2 мл 1%-ного раствора крахмала и ставят весь штатив на 15 мин на водяную баню при 45 °C, после чего штатив переносят в холодную воду (для прекращения действия фермента).

После этого в каждую пробирку вносят по одной капле 0,02 N раствора йода и наблюдают за стойкостью окрашивания в пробирках (синего, красно-синего, красного или желтого). Если окраска исчезает быстро, то прибавляют по каплям йод, пока она не будет исчезать в течение нескольких минут.

Расчет: в той пробирке, где жидкость окрашена в синий цвет, диастатического действия нет. Оно закончилось в предыдущей пробирке, которую и берут для расчета. Например: в шестой пробирке имеется непереваренный крахмал. Вычисляют, какое количество мочи содержится в пятой пробирке (разведение 1 : 16), где нет синего оттенка. 1/16 мл мочи переваривает 2 мл крахмала, 1 мл мочи — 32 мл крахмала.

Результат: d (диастаза) 45о/15' = 32 единицы.

Оцените статью: (16 голосов)
3.69 5 16
Статьи из раздела Лабораторные исследования на эту тему:
Бактериоскопическое исследование мочи с целью обнаружения туберкулезных микобактерий
Исследование мочевых камней
Исследование мочи на опухолевые клетки
Исследование осадка мочи
Исследование физических свойств мочи

2007-2016 © Copyright ООО «МЕДКАРТА». Все права на материалы, находящиеся на сайте medkarta.com,
охраняются в соответствии с законодательством РФ, в том числе, об авторском праве и смежных правах.